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婴儿配方乳粉中食源性致病菌双重ERA快速检测方法的建立

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为快速多重筛查婴儿配方乳粉中食源性致病菌的污染情况,建立克罗诺杆菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌及金黄色葡萄球菌双重酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)快速检测方法.首先,通过筛选确定对4种食源性致病菌特异性好、扩增效率高的引物探针.经过优化建立两组双重ERA检测体系可快速筛查4种食源性致病菌.该方法对沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌及金黄色葡萄球菌的检出限均为10-2 ng/μL:对克罗诺杆菌的检出限为1ng/μL.模拟污染实验显示,污染量为1 CFU/mL的样品增菌培养6 h后,可检出4种致病菌.应用该方法对市售婴儿配方乳粉样品进行检测,检测结果与行业标准规定的实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法一致,证实了本研究建立的双重ERA检测方法的准确性和可靠性.采用本方法仅需20 min左右即可一次性检出4种致病菌,相较于传统的"金标准"方法以及实时荧光PCR法显著提高了检测效率,对于推进食源性致病菌的快速筛查具有重要意义.
Establishment of a Dual Enzymatic Recombinase Amplification Method for Rapid Detection of Foodborne Pathogens in Infant Formula Powder

enzymatic recombinase amplificationCronobacterSalmonellaListeria monocytogenesStaphylococcus aureus

林志伟、王帅、王迎春、吴占文、李涛、李红娜、杨艳歌、袁飞

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黑龙江八一农垦大学农学院,黑龙江大庆 163000

中国检验检疫科学研究院,国家市场监管重点实验室(食品质量与安全),北京 100176

黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆 163000

酶促等温扩增技术 克罗诺杆菌 沙门氏菌 单核细胞增生李斯特菌 金黄色葡萄球菌

"十三五"国家重点研发计划重点专项"十三五"国家重点研发计划重点专项

2022YFF06079002018YFC1603606

2023

食品科学
北京食品科学研究院

食品科学

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:1.327
ISSN:1002-6630
年,卷(期):2023.44(18)
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