棘孢木霉天冬氨酸蛋白酶基因的克隆表达及其对大豆分离蛋白的水解

扫码查看

原文链接

万方数据
维普

中文摘要：为开发木霉天冬氨酸蛋白酶的应用潜能,采用实时聚合酶链式反应技术,从棘孢木霉(Trichoderma asperellum)中克隆蛋白酶基因asp,并在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中成功表达,进一步对重组蛋白酶rAsp进行分离纯化,分析其生化特性及对大豆分离蛋白的水解作用.结果显示,asp基因编码的蛋白酶属于天冬氨酸蛋白酶家族,其序列与本家族成员序列相似性最高为47.74％.在三角瓶中诱导表达时,发酵液中rAsp的酶活力为25.8 U/mL.rAsp最适反应pH值和温度分别为2.5和45 ℃,在pH 2.0～6.0范围和45 ℃以下具有较强的稳定性.Cu2+和Mn2+具有促进rAsp活性的作用,而Fe3+、十二烷基硫酸钠和胃蛋白酶抑制剂显著抑制rAsp的活性.rAsp对大豆分离蛋白的水解效率较商业化胃蛋白酶高7.7％;同时,降低β-伴大豆球蛋白和球蛋白致敏性的能力分别是胃蛋白酶的1.4倍和1.8 倍.因此,rAsp在大豆蛋白加工应用中具有潜在的开发价值.

外文标题：Cloning and Expression of an Aspartic Protease Gene from Trichoderma asperellum and Its Application to the Hydrolysis of Soy Protein Isolate

外文关键词：

Trichoderma asperellumrecombinant aspartic proteasebiochemical propertiessoy protein isolateallergenicity

作者：

周迪、邱小娴、柯野、胡秋怡

展开 >

作者单位：

韶关学院英东生物与农业学院,广东韶关 512005

关键词：

棘孢木霉重组天冬氨酸蛋白酶生化特性大豆分离蛋白致敏性

基金：

广东省科技创新战略专项广东省自然科学基金韶关学院自然科学类科研项目广东省科技创新战略专项大学生科技创新培育项目韶关学院校级质量工程建设项目(2022)

项目编号：

2018A0303130108SZ2020KJ06pdjh2023b0474课程教研27

出版年：

2023

DOI：

10.7506/spkx1002-6630-20230212-105

食品科学

北京食品科学研究院

食品科学

CSTPCDCSCD北大核心

影响因子：1.327

ISSN：1002-6630

年,卷(期)：2023.44(20)

参考文献量10