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雨生红球藻新型抗氧化肽的制备纯化、鉴定筛选及其对秀丽线虫抗氧化能力的影响

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为深入挖掘藻渣的高附加值,本实验开展雨生红球藻抗氧化肽的制备和活性研究.将雨生红球藻蛋白酶解物作为原料,以2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基清除力为活性跟踪指标,通过超滤、制备型和分析型高效液相色谱,纯化制备抗氧化多肽组分;经高效液相色谱-串联质谱法鉴定氨基酸序列,同时采用分子对接技术筛选并确定雨生红球藻抗氧化肽,并揭示作用机理;基于秀丽隐杆线虫模型,评价藻多肽的体内抗氧化活性.结果表明,雨生红球藻多肽组分的抗氧化能力经分离后提高2.96 倍,选择自由基清除力最强的组分i(0.25 mg/mL时ABTS阳离子自由基清除率(96.97±2.00)%)进行结构鉴定,获得10 条多肽序列i-1～i-10;分子对接结果显示,i-1与ABTS阳离子自由基的最小结合自由能最低,表明其抗氧化能力最强,确定新型雨生红球藻抗氧化肽(Haematococcus pluvialis antioxidant peptide,HPp)序列为KFTPAP.体内实验表明,HPp能有效改善秀丽线虫的抗氧化能力(P＜0.05),包括超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活力及丙二醛含量,且在100 μmol/L时效果最佳.推测C端聚集疏水性氨基酸、含有苯丙氨酸和来源于叶绿素蛋白,可能是HPp具有较强抗氧化能力的原因.研究结果为雨生红球藻藻渣的高值化利用提供理论指导,并为食源性抗氧化剂的开发提供思路.
Preparation,Purification and Identification of a Novel Antioxidant Peptide from Haematococcus pluvialis and Its Effect on the Antioxidant Capacity of Caenorhabditis elegans

Haematococcus pluvialisantioxidant peptidepurificationidentificationmolecular dockingCaenorhabditis elegans

何宛诗、郑钦生、陈小艳、夏增慧、曹庸、刘晓娟

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华南农业大学食品学院,广东省功能食品活性物重点实验室,广东 广州 510642

雨生红球藻 抗氧化肽 分离纯化 结构鉴定 分子对接 秀丽隐杆线虫

国家自然科学基金面上项目广东省自然科学基金面上项目广东省新能源和可再生能源研究开发与应用重点实验室开放基金

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2023

10.7506/spkx1002-6630-20230208-077

食品科学
北京食品科学研究院

食品科学

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.327
ISSN：1002-6630
年,卷(期)：2023.44(22)
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