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米曲霉3.042尿苷/尿嘧啶营养缺陷型遗传转化体系的构建

Construction of Aspergillus oryzae 3.042 Uridine/Uracil Auxotrophy Genetic Transformation System

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米曲霉对潮霉素等多种抗生素不敏感,对其基因改造有一定困难.该研究以米曲霉3.042为出发菌株,建立pyrG筛选标记遗传转化体系.首先,分别运用紫外诱变法和左右臂同源重组法破坏米曲霉自身的pyrG基因,在含有5-氟乳清酸和尿苷/尿嘧啶的培养基平板进行筛选,最终两种方法分别获得性状稳定的尿苷/尿嘧啶营养缺陷型突变株米曲霉O11和米曲霉g-1.随后以缺陷型突变株为出发菌株,利用农杆菌转化法转入包含pyrG回补标记的质粒,其中米曲霉g-1突变株获得原养型的回补菌株,紫外诱变法获得的缺陷型突变菌株米曲霉O11未能恢复为原养型.研究表明米曲霉3.042 pyrG基因大片段缺失的缺陷型菌株,可直接以自身pyrG基因作为选择标记进行遗传改造.

毕付提、史亚楠、张久祎、王静然、薛鲜丽、王德培

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天津科技大学生物工程学院,天津300457

工业发酵微生物教育部重点实验室,天津300457

江苏恒顺醋业股份有限公司,江苏镇江212000

米曲霉3.042 尿苷/尿嘧啶营养缺陷型 紫外诱变 根癌农杆菌介导的转化法 pyrG

国家973计划国家自然科学基金青年科学基金山东省重点支持计划

2013CB734004319021932016GRC3201

2021

10.12161/j.issn.1005-6521.2021.03.031

食品研究与开发
天津市食品研究所,天津市食品工业生产力促进中心

食品研究与开发

CSTPCD北大核心
影响因子：0.561
ISSN：1005-6521
年,卷(期)：2021.42(3)
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