试验以鸡蛋壳膜为原料,通过酶解法制备小分子肽,并对其生物活性进行研究.以水解度为评价指标,通过单因素试验确定蛋白酶种类、酶解时间、料液比以及酶添加量等因素对壳膜多肽水解度的影响,并通过响应面设计(Box-Behnken design,BBD)对酶解条件进行三因素三水平优化;通过高效凝胶过滤色谱测定酶解后壳膜多肽分子量的分布情况,并测定壳膜多肽对DPPH·、ABTS+·、·OH、O2-·的清除能力.结果表明,最佳酶解工艺条件为碱性蛋白酶(AP-200a),酶添加量2.4％,料液比1:9.5(g/mL),酶解时间5 h;在此条件下,壳膜多肽水解度为27.15％,水解后相对分子质量小于1000 Da的小分子肽所占比例为90.9％;且壳膜多肽对DPPH·、ABTS+·的清除率分别为(93.03±0.51)％、(94.53±0.92)％,与VC的效果相当;但对·OH和O2-·的清除率分别为(43.33±1.10)％和(53.40±0.70)％.因此,通过该法酶解得到的壳膜多肽中小分子肽占比较高,易被人体消化吸收,且具有一定抗氧化活性.
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