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双孢蘑菇中AbbHLH的表达、纯化及多克隆抗体制备

Expression, Purification and Polyclonal Antibody Preparation of AbbHLH in Agaricus bisporus

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碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)转录因子在真核生物中广泛存在,是数量较多的转录因子家族之一.该文首次克隆并鉴定双孢蘑菇中的一个AbbHLH(Agaricus bisporus basic helix-loop-helix)转录因子,建立原核表达载体pET-28a(+)-AbbHLH并将其转至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达,得到主要以包涵体形式存在的6×His-AbbHLH重组蛋白,经纯化与复性后得到纯度超过80％的抗原蛋白.用制备的抗原蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,间接酶联免疫吸附测定法测定结果表明抗体血清的效价可达102400.将抗体血清依次经Protein A及CNBr亲和纯化后,用Western Blotting检测抗体特异性,结果表明该抗体能够特异性识别双孢蘑菇中的AbbHLH蛋白.

赵诗睿、奚志嫒、孟德梅、生吉萍

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双孢蘑菇 bHLH转录因子 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体

国家自然科学基金中国博士后科学基金面上项目(第六十九批)国家级大学生创新创业训练计划

315015442021M692399202210057023

2022

10.12161/j.issn.1005-6521.2022.23.024

食品研究与开发
天津市食品研究所,天津市食品工业生产力促进中心

食品研究与开发

CSTPCD北大核心
影响因子：0.561
ISSN：1005-6521
年,卷(期)：2022.43(23)
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