从黄豆酱中分离筛选对植物病害有防治效果的拮抗菌,提取发酵液中的拮抗物质,研究其抑菌机理及基本性质.采用稀释平板法分离细菌、平板对峙法筛选拮抗菌,通过形态特征、生理生化特征及16S rRNA鉴定菌种,硫酸铵沉淀法提取发酵液中的拮抗物质,考马斯亮蓝法测得蛋白含量,扫描电镜观察拮抗物质抑菌作用,琼脂孔扩散法测定拮抗物质抑菌谱及其活性的稳定性.从黄豆酱中分离出18株细菌,通过筛选,得到一株拮抗效果最好的菌株,菌体抑菌率62.78％,发酵液抑菌率53％,命名为4-z-3,经鉴定为Bacillus siamensis.4-z-3发酵液在硫酸铵饱和度为20％～30％时提取的粗提物抗菌活性最大,为60.8％.最适饱和度下提取的粗提物的蛋白质含量为3.45％.拮抗物质对多种病原菌有良好的拮抗效果.经过4-z-3粗提物处理的病原真菌,菌丝受到破坏,细胞形状改变,细胞完整性缺失.粗提物的稳定性方面,对热不敏感,仅在90和100℃时抑菌活性下降明显;对酸碱不敏感,pH值为4时仍有81.6％的抑菌活性;对蛋白酶不敏感,抑菌活性最低时降低了19.6％;对紫外线不敏感,照射12 h之后抑菌活性仍有92.5％.本研究表明,菌株4-z-3是一株具有发展潜力的农业生防菌,分泌的胞外拮抗物质能够有效防治多种植物病害,且抑菌活性稳定.
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