生物技术2013，Vol.23Issue(6) ：37-41.DOI:10.3969/j.issn.1004-311X.2013.06.0132

抗菌肽DCD-1L在大肠杆菌中的表达及活性鉴定

Fusion Expression of DCD-1L in Escherichia coil and Its Antimicrobial Activity Analysis

王炯蓉 李志忠 王芳 袁红霞 田彩平 廖世奇 马瑾 马宁 黄小娟
生物技术2013，Vol.23Issue(6) ：37-41.DOI:10.3969/j.issn.1004-311X.2013.06.0132
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抗菌肽DCD-1L在大肠杆菌中的表达及活性鉴定

Fusion Expression of DCD-1L in Escherichia coil and Its Antimicrobial Activity Analysis

王炯蓉 1李志忠 1王芳 2袁红霞 2田彩平 2廖世奇 2马瑾 2马宁 2黄小娟1
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作者信息

  • 1. 兰州理工大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730050
  • 2. 甘肃省医学科学研究院,甘肃兰州730050
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摘要

目的:利用大肠杆菌表达系统表达抗菌肽DCD-1L并鉴定其抑菌活性.方法:根据DCD-1L氨基酸序列以及大肠杆菌密码子偏爱性设计出DCD-1L的基因序列,通过重叠延伸PCR扩增出完整的DCD-1L编码序列,接着用酶切,连接,转化等方法获得重组表达载体pET-32a-DCD-1L,并将其进行PCR,酶切及测序鉴定.将鉴定正确的重组体转化E.coli transetta菌株,经终浓度0.5mmol/L IPTG诱导表达后,用SDS-PAGE分析目的蛋白表达状况,并用抑菌圈实验检测其抑菌活性.结果:SDS-PAGE检测DCD-1L在28KDa处有目的条带,抑菌圈实验结果显示DCD-1L对地衣芽胞杆菌,金黄色葡萄球菌,绿脓杆菌以及肺炎链球菌均有明显的抑菌活性.结论:成功构建重组表达载体pET-32a-DCD-1L并在E.coli transetta菌株中成功表达,获得了对多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有抑菌活性的抗菌肽DCD-1L.

关键词

抗菌肽/DCD-1L/大肠杆菌/基因重组/融合表达/抑菌活性

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出版年

2013
生物技术
黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会 黑龙江省科学院微生物研究所

生物技术

CSCD北大核心
影响因子：0.611
ISSN：1004-311X
被引量2
参考文献量6
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