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木瓜ISSR-PCR反应体系的建立与优化

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[目的]获得最佳的木瓜ISSR-PCR扩增反应体系.[方法]采用单因素试验和正交实验对木瓜ISSR-PCR反应体系的DNA模板浓度、引物浓度、延伸时间、循环次数等因素进行梯度优化.[结果]得到了木瓜ISSR-PCR的最佳反应体系(20 μL)为引物浓度0.5 μmol/L,DNA模板50 ng,Mix 10 μL,ddH2O补全;最佳扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性45 s,退火45 s,72℃延伸90 s,35个循环;72℃延伸7 min,4℃保存.[结论]优化确定的木瓜ISSR-PCR反应体系稳定可靠,为后续木瓜种质资源及遗传多样性研究奠定基础.
Establishment and optimization of ISSR-PCR reaction system for Chaenomeles Fructus

聂金娥、郭庆梅、王兴军、周凤琴

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山东中医药大学附属医院,山东济南250011

山东中医药大学,山东济南250011

山东省农业科学院,山东济南250011

木瓜 ISSR-PCR 单因素试验 正交设计 体系优化

山东省重点研发计划医疗服务与保障能力提升补助资金(中医药事业传承与发展部分)全国中药资源普查项目(2019)

2018GSF119004财社[2019]39号

2022

10.16519/j.cnki.1004-311x.2022.01.0006

生物技术
黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会 黑龙江省科学院微生物研究所

生物技术

CSTPCD
影响因子：0.611
ISSN：1004-311X
年,卷(期)：2022.32(1)
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