摘要
利用柱层析方法,纯化鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)烈性噬菌体AB1.首先采用聚乙二醇6000沉淀方法,初步分离裂解液中的噬菌体,噬菌体纯度由6.1×1010pfu/mg提高到37×1010pfu/mg,噬菌体回收率为58.8%,蛋白质去除率为90.6%;噬菌体粗提样品经Sepharose 4B凝胶过滤层析柱进一步纯化,纯度提高到73×1010pfu/mg,噬菌体回收率为95.7%,蛋白质去除率为48.1%;收集的噬菌体样品最后经DEAE-52阴离子交换层析柱处理,噬菌体纯度为40×1010pfu/mg,回收率为50.8%,蛋白去除率15.6%.内毒素分析结果显示,Sepharose 4B凝胶过滤层析纯化的噬菌体样品中,内毒素含量为443.8 EU/mg,而DEAE-52阴离子交换层析纯化的噬菌体样品中,内毒素含量为544.4 EU/mg.实验结果显示,PEG沉淀方法与Sepharose 4B凝胶过滤方法能够有效地提高噬菌体纯度,而DEAE-52阴离子交换层析则不能提高噬菌体的纯度,也无法有效地去除样品中的内毒素.
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