生物学杂志2024,Vol.41Issue(5) :107-114.DOI:10.3969/j.issn.2095-1736.2024.05.107

牛Ⅰ型胶原的性能表征及标准样品研制

Characterization and development of reference material of bovine type Ⅰ collagen

高建萍 张天阳 张扬 邢芳毓 罗希 孔英俊 徐丽明 张贵锋
生物学杂志2024,Vol.41Issue(5) :107-114.DOI:10.3969/j.issn.2095-1736.2024.05.107

牛Ⅰ型胶原的性能表征及标准样品研制

Characterization and development of reference material of bovine type Ⅰ collagen

高建萍 1张天阳 2张扬 2邢芳毓 2罗希 2孔英俊 2徐丽明 3张贵锋1
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作者信息

  • 1. 中国科学院过程工程研究所 生化工程国家重点实验室,北京 100190;中国科学院过程工程研究所生物药制备与递送重点实验室,北京 100190;中国科学院大学化学工程学院,北京 100049
  • 2. 中国科学院过程工程研究所 生化工程国家重点实验室,北京 100190;中国科学院过程工程研究所生物药制备与递送重点实验室,北京 100190
  • 3. 中国食品药品检定研究院,北京 100050
  • 折叠

摘要

以牛Ⅰ型胶原作为研究对象,胶原标准样品研制为目标,对其红外光谱特征、三螺旋结构、热稳定性、氨基酸覆盖率、端肽残留、分子质量等主要性能指标进行分析,将羟脯氨酸含量作为判定依据对产品的均匀性进行分析;利用SDS-PAGE法对其稳定性进行分析;以8家实验室测定的羟脯氨酸含量进行定值和不确定度分析.结果表明,该产品的各项性能指标符合胶原蛋白的质量要求.该牛Ⅰ型胶原产品在95%置信区间内均匀性良好;在4℃放置2周、4周,25 ℃放置1周、2周,反复冻融1次、3次和5次及在-20 ℃放置6个月,产品稳定性良好;羟脯氨酸含量的定值结果为11.17%,置信度为95%时扩展不确定度为0.03(k=2).因此,该牛Ⅰ型胶原可作为国家标准样品用于胶原产品的质量评价.

Abstract

Bovine type Ⅰ collagen was used as the research object.The main purpose was to develop the reference material of bovine type Ⅰ collagen.The characterizations,such as infrared spectroscopy(IR),triple helix structure,thermal stability,amino acid sequence coverage,terminal peptide residue,molecular weight et al,were analyzed.The homogeneity and stability were evaluated using the con-tent of hydroxyproline and the SDS-PAGE,respectively.The value assignment and uncertainty assessment were evaluated using the content of hydroxyproline from eight laboratories.The results indicated that bovine type Ⅰ collagen met the requirement of collagen.The homogeneity of bovine type Ⅰ collagen was excellent in confidence coefficient of 95%.And it had good stability within 2 and 4 weeks at 4 ℃,1 and 2 weeks at 25℃,repeated freezing and thawing 1,3 and 5 times,and 6 months at-20 ℃.The certified value of the hydroxyproline was 11.17%with the expanded uncertainty of 0.03 in confidence coefficient of 95%.Therefore,the bovine type Ⅰcollagen could be used as national reference material for the quality evaluation of collagen products.

关键词

牛Ⅰ型胶原/标准样品/性能表征/均匀性/稳定性/定值

Key words

bovine type Ⅰ collagen/reference material/performance characterization/homogeneity/stability/certification

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基金项目

北京市自然科学基金-昌平创新联合基金项目(L234071)

国家重点研发计划项目(2021YFC2400804)

出版年

2024
生物学杂志
合肥市科学技术协会

生物学杂志

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.554
ISSN:2095-1736
参考文献量5
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