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重组突变巴曲酶酶动力学及活性分析研究

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目的 对重组突变巴曲酶进行酶动力学初步研究,并建立一种蛇毒类凝血酶活性测定方法 .方法使用可控温(37℃)紫外分光光度计,采用酶动力学测定法,测定重组突变巴曲酶的米氏常数,优化活性测定方法的反应时间和线性范围,验证此方法精密度,并用发色底物法与血浆凝集法同时测定不同蛇种来源的类凝血酶活性.结果 重组突变巴曲酶的米氏常数(37℃)Km值为256.28μmol/L、Vm值为0.005077μmol/min.该法呈现相应的剂量关系曲线,反应时间优选为0～20 min,线性范围优选为1～16.8 nmol/L,拟合度R2≥0.99,方法精密度的变异系数≤5.0％.两种不同方法测定不同蛇种来源类凝血酶的活性单位比例范围为3.3～3.7(发色底物法/血浆凝集法),比例关系一致.结论 建立的蛇毒类凝血酶活性测定方法拟合度优,精密度高,可测定不同来源的类凝血酶活性,并可替代传统血浆凝集活性测定法.
Kinetics and Activity Analysis of Recombinant Mutant Batroxobin

李娜、兰海英、康乐、陈宏超、徐梅

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辽宁远大诺康生物制药有限公司,辽宁沈阳 110171

蛇毒类凝血酶 巴曲酶 酶动力学 活性分析 发色底物法 血浆凝集法

2019

蛇志
中国蛇协

蛇志

影响因子：0.439
ISSN：1001-5639
年,卷(期)：2019.31(1)
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