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海洋微生物Cellulophaga algicola DSM 14237木聚糖酶的分子鉴定及酶学性质

Molecular identification and enzymatic properties of marine microorganism Cellulophaga algicola DSM 14237 xylanase

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从海洋微生物中挖掘酶基因资源是获取新型工业酶的重要途径.从海洋微生物基因组资源库中发掘到一个来源于海洋微生物Cellulophaga algicola DSM 14237的木聚糖酶基因(Xyn14237).通过氨基酸序列比对和三维结构模拟分析得知Xyn14237属于糖苷水解酶第10家族.将部分截短并密码子优化后的Xyn14237在大肠杆菌BL21内进行重组表达,通过镍柱亲和纯化获得重组Xyn14237,采用还原糖法测定其酶学性质.结果显示Xyn14237的最适催化温度和pH分别40℃和7.0.酶分子在pH 5～10之间稳定性较好,相对酶活均保持在90％以上.酶分子不耐热,当温度超过30℃时其活性急剧下降.以榉木木聚糖为底物,Xyn14237的最大反应速度为1627.31 U/mg,Km为3.15 mg/mL、kcat为975.98 s-1.薄层层析分析显示Xyn14237水解木聚糖释放出的产物为木三糖、木二糖及木糖.从分子和酶学性质层面上分析了来自海洋微生物C.algicola的第一个木聚糖酶基因.

丁睿、谢会芳、韩正刚、杨江科

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武汉轻工大学 生命科学与技术学院,武汉430023

海洋微生物 木聚糖酶 10家族糖苷水解酶 酶学性质 原核表达 亲和纯化 蛋白质三维结构模拟

2022

10.3969/j.issn.2095-7386.2022.01.003

武汉轻工大学学报
武汉工业学院

武汉轻工大学学报

影响因子：0.356
ISSN：1009-4881
年,卷(期)：2022.41(1)
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