摘要
α-淀粉酶是一种可以水解淀粉中α-1,4-糖苷键的水解酶,它将大分子的淀粉水解为小分子的葡萄糖.对来自蜜蜂的α-淀粉酶进行密码子优化和全基因合成,将合成后的基因克隆至穿梭载体pYES2-α-factor,转化进宿主菌INVSc1.通过碘染法筛选鉴定阳性克隆子,确定重组菌株最佳诱导后产酶时间为22 h,利用DNS法确定该酶最适pH为9.0,最适温度为50℃,在最适条件下(28℃,诱导时间22 h)诱导,重组菌表达α-淀粉酶最大产酶浓度为2809.1 U/mL.诱导表达收集其上清粗酶液后,经SDS-PAGE电泳,测定其分子量大约为60 kDa,比预期分子量稍大,可能与糖基化有关.
维普
万方数据