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蜜蜂α-淀粉酶基因在酿酒酵母中的表达

Expression of α-amylase gene from Apis mellifera L. in Saccharomyces cerevisiae

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α-淀粉酶是一种可以水解淀粉中α-1,4-糖苷键的水解酶,它将大分子的淀粉水解为小分子的葡萄糖.对来自蜜蜂的α-淀粉酶进行密码子优化和全基因合成,将合成后的基因克隆至穿梭载体pYES2-α-factor,转化进宿主菌INVSc1.通过碘染法筛选鉴定阳性克隆子,确定重组菌株最佳诱导后产酶时间为22 h,利用DNS法确定该酶最适pH为9.0,最适温度为50℃,在最适条件下(28℃,诱导时间22 h)诱导,重组菌表达α-淀粉酶最大产酶浓度为2809.1 U/mL.诱导表达收集其上清粗酶液后,经SDS-PAGE电泳,测定其分子量大约为60 kDa,比预期分子量稍大,可能与糖基化有关.

李蓬茸、曾维斯、彭芳、吴菁、李鑫、闫达中

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武汉轻工大学 生命科学与技术学院,武汉430023

蜜蜂 α-淀粉酶 密码子优化 酿酒酵母

2022

武汉轻工大学学报
武汉工业学院

武汉轻工大学学报

影响因子:0.356
ISSN:1009-4881
年,卷(期):2022.41(6)
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