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菊芋叶绿体分离方法比较研究

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以菊芋叶片为材料,通过比较提取其叶绿体DNA的5种方法(改良高盐-低pH法、Percoll密度梯度离心法、GENMED试剂盒物理法、GENMED试剂盒化学法及DNaseⅠ差速离心分离法),筛选出适合菊芋叶绿体NDA的提取方法.利用显微镜、核酸蛋白测定仪、琼脂糖凝胶电泳及菊芋基因特异引物RAPD检测.结果 显示:改良高盐-低pH法分离得到的叶绿体在40×物镜下其数目多,浓度高,背景清晰,提取菊芋叶片cpDNA的OD260/OD280为1.926,质量浓度为295.63 μg/μL.经10 g/L琼脂糖凝胶电泳检测发现,cpDNA条带清晰整齐,无核DNA污染;且提取的cpDNA通过4对引物均能扩增到片段.结果 表明,改良高盐-低pH法能够快速获得菊芋高质量的叶绿体DNA.
Comparison of Chloroplast DNA Extraction Methods from Jerusalem artichoke

许盼盼、杨世鹏、王丽慧、孙雪梅、高洁铭、李莉、钟启文

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青海大学农林科学院青海省蔬菜遗传与生理重点实验室,西宁810016

青海大学农牧学院,西宁810016

青海大学三江源生态和高原农牧业国家重点实验室,西宁810016

改良高盐-低pH法 叶绿体基因组提取 叶绿体分离 菊芋

国家自然科学基金国家自然科学基金国家自然科学基金青海省科技厅项目

3146052331660569316605882016-ZJ-751

2019

西北农业学报
西北农林科技大学,甘肃,宁夏,青海,新疆农（林）业科学院及青海,新疆畜牧（兽医）科学院及新疆农垦科学院

西北农业学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.629
ISSN：1004-1389
年,卷(期)：2019.28(4)
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