PU.1和KLF7基因在多个组织中的表达具有相关性.在前脂肪细胞分化过程中,两个转录因子都可以通过抑制PPARγ的表达而抑制脂肪形成.然而两者是否存在蛋白水平相互作用还不清楚.为了验证PU.1和KLF7在前脂肪细胞中的关系,该研究构建了重组表达载体pECFP-N1-PU.1和pEYFP-N1-KLF7,并瞬时转染到3T3-L1前脂肪细胞系中.利用激光共聚焦显微镜,观察到PU.1和KLF7蛋白共定位于3T3-L1细胞核中.荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)实验分析显示,PU.1和KLF7之间有明显的能量共振转移.实验结果证实,PU.1和KLF7之间存在直接的相互作用关系,为脂肪生成的调控机制研究提供新思路.
The Study of Mouse PU.1 and KLF7 Protein Interaction by FRET Technology
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