新疆农业大学学报2023，Vol.46Issue(3) ：234-239.DOI:10.20088/j.cnki.jxau.2023.03.010

苜蓿矮化病毒实时荧光定量PCR检测体系的建立

Establishment of Real-time Fluorescence Quantitative PCR Detection System for Alfalfa Dwarf Virus

党开祥 万超越 王思越 李克梅 托伦巴特·毕亚洪
新疆农业大学学报2023，Vol.46Issue(3) ：234-239.DOI:10.20088/j.cnki.jxau.2023.03.010
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苜蓿矮化病毒实时荧光定量PCR检测体系的建立

Establishment of Real-time Fluorescence Quantitative PCR Detection System for Alfalfa Dwarf Virus

党开祥 1万超越 1王思越 1李克梅 1托伦巴特·毕亚洪2
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作者信息

  • 1. 新疆农业大学 农学院/农业农村部西北荒漠绿洲农林外来入侵生物防控重点实验室(部省共建)/农林有害生物监测与安全防控重点实验室,乌鲁木齐 830052
  • 2. 新疆塔城地区塔城市二工镇农业(畜牧业)发展中心,塔城 834300
  • 折叠

摘要

为灵敏、快速检测紫花苜蓿(Medicago sativa L.)中的苜蓿矮化病毒(ADV),根据该病毒L蛋白保守序列设计特异性引物,建立基于SYBR Green Ⅰ染料的实时荧光定量PCR检测体系,并应用该方法对田间样品和种子进行快速检测.结果表明,建立的RT-qPCR检测技术可对苜蓿中的苜蓿矮化病毒含量进行精确检测,最低检测浓度为9.8×102copies/μL,灵敏度约是常规PCR的100倍.通过对101份苜蓿样品的检测验证,该方法阳性检出率为61%,较常规PCR高6%.挑选的10份苜蓿种子中有3份被检测出携带苜蓿矮化病毒,病毒含量范围为0～3.02×106copies/μL.表明建立的RT-qPCR检测体系特异性强、灵敏度高,可应用于苜蓿矮化病毒的定量检测.

关键词

紫花苜蓿/苜蓿矮化病毒/实时荧光定量PCR/检测体系

Key words

Medicago sativa L./alfalfa dwarf virus/real-time fluorescence quantitative PCR/detection system

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基金项目

国家重点研发计划(2022YFD1401101)

国家自然科学基金(31760708)

出版年

2023
新疆农业大学学报
新疆农业大学

新疆农业大学学报

影响因子：0.599
ISSN：1007-8614
参考文献量16
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