为灵敏、快速检测紫花苜蓿(Medicago sativa L.)中的苜蓿矮化病毒(ADV),根据该病毒L蛋白保守序列设计特异性引物,建立基于SYBR Green Ⅰ染料的实时荧光定量PCR检测体系,并应用该方法对田间样品和种子进行快速检测.结果表明,建立的RT-qPCR检测技术可对苜蓿中的苜蓿矮化病毒含量进行精确检测,最低检测浓度为9.8×102copies/μL,灵敏度约是常规PCR的100倍.通过对101份苜蓿样品的检测验证,该方法阳性检出率为61%,较常规PCR高6%.挑选的10份苜蓿种子中有3份被检测出携带苜蓿矮化病毒,病毒含量范围为0～3.02×106copies/μL.表明建立的RT-qPCR检测体系特异性强、灵敏度高,可应用于苜蓿矮化病毒的定量检测.
Establishment of Real-time Fluorescence Quantitative PCR Detection System for Alfalfa Dwarf Virus
Medicago sativa L.alfalfa dwarf virusreal-time fluorescence quantitative PCRdetection system
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