摘要
旨在探究WNT2在绵羊卵泡颗粒细胞(GCs)中的表达及功能.本研究选取4～6月龄健康母羊20只,采集双侧卵巢,免疫组化技术检测WNT2蛋白在卵泡中的表达定位;qRT-PCR及Western blot技术检测其在不同发育阶段卵泡颗粒细胞中的表达差异;siRNA沉默GCs中的Wnt基因后,qRT-PCR技术检测Wnt基因及参与经典WNT信号通路关键基因CTNNB1的相对表达量,并测定GCs凋亡情况.结果 表明:1)WNT2蛋白在绵羊卵泡内膜细胞、颗粒细胞以及卵丘细胞内均有表达.2)qRT-PCR及Western blot结果基本一致,均表明WntmRNA及蛋白在不同发育阶段卵泡颗粒细胞表达差异显著(P＜0.05),且在大卵泡颗粒细胞内表达量显著高于中卵泡颗粒细胞(P＜0.05),中卵泡颗粒细胞内表达量显著高于小卵泡颗粒细胞(P＜0.05).3)基因沉默后,沉默组Wn记和CTNNB1的表达量均显著低于无义序列siRNA组(NC组)以及空白对照组(P＜0.05),而Wnt基因沉默组细胞凋亡率显著高于其他两组(P＜0.05).综上表明,WNT2是通过WNT2/CTNNB1信号通路促进绵羊卵泡颗粒细胞生物学功能的.
基金项目
山西省国际科技合作项目(201603D421006)
山西省青年三晋学者专项()
国家自然科学基金(31873002)
山西省科技创新团队资金(201705D131028-20)
山西省农业科学院优势课题组自选(YYS1717)
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