摘要
旨在探讨高铜对大鼠心肌细胞线粒体自噬的影响.将32只8月龄健康大鼠随机分为4组,每组8只,饲喂不同铜含量日粮(对照组:15 mg·kg-1;高铜Ⅰ组:30 mg· kg-1;高铜Ⅱ组:60mg·kg-1;高铜Ⅲ组:120mg·kg-1),连续饲喂6个月后采集心.检测心组织铜含量及其病理变化;荧光定量检测线粒体自噬相关基因LC3A、LC3B、Parkin、PINK1、p62的mRNA水平;蛋白印迹检测Parkin、PINK1、LC3B/LC3A的蛋白表达水平;免疫组化和免疫荧光检测LC3B的定位及表达.结果 显示,高铜各组大鼠心组织内的铜含量均高于对照组.高铜各组出现心肌纤维排列疏松、无规则的现象.与对照组相比,高铜各组LC3A、LC3B mRNA表达量增加;高铜Ⅱ组、高铜Ⅲ组p62的mRNA表达量极显著降低;高铜各组PINK1 mRNA表达量显著升高,而Parkin mRNA的表达量有上升趋势但不显著.随着日粮中铜含量的增加,PINK1、Parkin、LC3B/LC3A的蛋白的表达量显著上调.LC3B定位于细胞质中,且高铜Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组LC3B表达量均显著增加.试验结果表明,高铜可诱导大鼠心肌细胞线粒体自噬的发生.
基金项目
国家自然科学基金(31572585)
“十三五”国家重点研发计划项目(2016YFD0501205)
“十三五”国家重点研发计划项目(2017YFD0502200)
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