摘要
为了建立一种快速定量检测猪伪狂犬病病毒(PRV)gB蛋白抗体的竞争化学发光酶联免疫检测方法,以大肠杆菌表达并纯化的猪伪狂犬病病毒gB重组蛋白作为包被抗原,以辣根过氧化物酶标记的抗gB蛋白单克隆抗体作为酶标抗体,以国家参考品稀释制备的校准品绘制标准曲线实现定量检测,成功建立的PRV-gB-CLEIA在45min内即可完成检测,可检测到最大稀释倍数为1:2 048稀释的国家参考品;与猪瘟等其他5种病毒抗原的标准阳性血清无交叉反应;批内变异系数为1.13％～9.47％,批间变异系数为2.43％～14.07％,重复性和稳定性较好.通过对采集的180份临床血清检测结果进行比较,该方法与中和试验阳性符合率为94.00％,阴性符合率为96.92％,总符合率为96.11％,明显优于商品化ELISA试剂盒.本研究建立的PRV-gB-CLEIA检测方法可以用于PRV gB抗体的快速定量检测.
基金项目
河南省科技创新人才计划项目(174200510003)
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