摘要
为了探究lncRNA TCONS_00791383对猪骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响.本研究利用qRT-PCR技术检测出生7d内大白仔猪6种组织(心、脾、肺、肾、背肌和腿肌)以及猪骨骼肌卫星细胞增殖分化前后TCONS_00791383的表达水平;通过设计反义核苷酸(antisense oligonucleotides,ASO)片段在猪骨骼肌卫星细胞中对TCONS_00791383进行敲低,检测敲低TCONS_00791383之后增殖分化标志基因的表达量变化;通过trans(co-ex-pression)对TCONS_00791383进行靶基因预测,使用DAVID对其进行GO富集和KEGG通路分析.结果 显示,TCONS_00791383在猪心脏中表达量最高,在脾和肾组织中不表达.在骨骼肌卫星细胞从增殖到分化的过程中,TCONS_00791383的表达量逐渐上升,且在分化后30 h表达量达到最高.在使用ASO片段敲低TCONS_00791383之后,与对照组相比,在分化24 h,增殖标志基因Pax3、Pax7表达量显著或极显著降低(P＜0.05,P＜0.01),分化标志基因MyoG表达量极显著降低(P＜0.01),在分化48 h,增殖标志基因Pax3表达量极显著降低(P＜0.01),Pax7表达量显著降低(P＜0.05),分化标志基因MyHC表达量显著降低(P＜0.05).预测得到的相关靶基因富集到AMPK、ATP等多个与骨骼肌卫星细胞增殖和分化过程相关的重要信号通路.本研究表明,lncRNA TCONS_00791383可能促进猪骨骼肌卫星细胞的增殖和分化.
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