畜牧兽医学报2020，Vol.51Issue(6) ：1219-1228.

miR-106b-5p靶向KLF4调控山羊肌内前体脂肪细胞分化

miR-106b-5p Regulates the Differentiation of Goat Intramuscular Preadipocytes by Targeting KLF4

杜宇 赵越 林亚秋 朱江江 王永 马洁琼 谢光杰
畜牧兽医学报2020，Vol.51Issue(6) ：1219-1228.
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miR-106b-5p靶向KLF4调控山羊肌内前体脂肪细胞分化

miR-106b-5p Regulates the Differentiation of Goat Intramuscular Preadipocytes by Targeting KLF4

杜宇 1赵越 2林亚秋 1朱江江 3王永 2马洁琼 1谢光杰3
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作者信息

  • 1. 西南民族大学青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部/四川省重点实验室,成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041
  • 2. 西南民族大学青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部/四川省重点实验室,成都610041
  • 3. 西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041
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摘要

旨在明确miR-106b-5p对山羊肌内前体脂肪细胞分化的影响,并确定这种作用是通过靶向KLF4来实现的.本研究利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测miR-106b-5p在山羊肌内前体脂肪细胞分化过程中的表达模式,通过脂质体转染技术将miR-106b-5p mimic和miR-106b-5p inhibitor转人体外培养的山羊肌内前体脂肪细胞,油红O染色法从形态学验证miR-106b-5p对脂肪细胞中脂滴积聚的影响,qRT-PCR检测预测的靶标基因KLF4和脂肪分化标志基因的表达情况,利用双荧光素酶报告系统鉴定miR-106b-5p与KLF4的靶标关系.qRT-PCR结果显示,miR-106b-5p在山羊肌内前体脂肪细胞诱导分化第3天时表达量最高.在山羊肌内脂肪细胞中干扰miR-106b-5p后油红O染色显示脂滴聚积减少,过表达miR-106b-5p后脂滴聚积增加.在山羊肌内前体脂肪细胞中转染miR-106b-5p inhibitor后PPARγ表达量显著降低(P＜0.05),而KLF4表达量极显著升高(P＜0.01);转染miR-106b-5p mimic后LPL和PPARγ表达量极显著升高(P＜0.01).荧光素酶活性试验结果显示,过表达miR-106b-5p可显著抑制KLF4荧光活性.miR-106b-5p通过靶向并负调节KLF4的表达促进山羊肌内脂肪细胞分化.

关键词

山羊/miR-106b-5p/KLF4/脂肪细胞/荧光素酶活性试验

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基金项目

国家重点研究计划专项(2018YFD0502002)

国家自然科学基金(31672395)

四川省应用基础研究计划重点项目(2018JY0036)

出版年

2020
畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.729
ISSN：0366-6964
被引量4
参考文献量7
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