畜牧兽医学报2021，Vol.52Issue(1) ：195-201.DOI:10.11843/j.issn.0366-6964.2021.01.020

禽腺病毒血清4型感染鸡组织中NLRP3基因转录水平的实时荧光定量PCR分析

Analysis of the Transcription Level of NLRP3 Gene in Fowl Adenovirus Serotype 4 Infected Chicken Tissues by a Real-time Fluorescence Quantitative PCR

郭慧芳 李宁 王白玉 乔麒龙 黄庆 李永涛 王增 赵军
畜牧兽医学报2021，Vol.52Issue(1) ：195-201.DOI:10.11843/j.issn.0366-6964.2021.01.020
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禽腺病毒血清4型感染鸡组织中NLRP3基因转录水平的实时荧光定量PCR分析

Analysis of the Transcription Level of NLRP3 Gene in Fowl Adenovirus Serotype 4 Infected Chicken Tissues by a Real-time Fluorescence Quantitative PCR

郭慧芳 1李宁 1王白玉 1乔麒龙 1黄庆 1李永涛 1王增 1赵军1
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作者信息

  • 1. 河南农业大学牧医工程学院,郑州450046
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摘要

旨在分析禽腺病毒血清4型(FAdV-4)感染鸡组织中NLRP3基因的转录水平,本研究设计鸡NLRP3特异性引物,利用RT-PCR扩增NLRP3基因180 bp片段并克隆至pMD-18T载体,制备重组质粒pMD-18T-NL-RP3.以pMD-18T-NLRP3质粒作为标准品进行荧光定量PCR并建立标准曲线.通过反应条件优化,成功建立了检测NLRP3基因的实时荧光定量PCR方法,并利用该方法对致病性FAdV-4感染鸡组织中NLRP3基因的转录水平进行了分析.结果显示,所设计的NLRP3引物可特异性扩增鸡NLRP3基因,建立的实时荧光定量PCR对鸡NLRP3标准质粒的扩增曲线良好,标准品的拷贝数与Cq值呈现良好的线性关系.与对照组相比,NLRP3分子在FAdV-4感染鸡肝和脾中的转录水平极显著高于对照组(P＜0.001),在盲肠扁桃体和法氏囊的表达显著高于对照组(P＜0.01).本研究所建立的鸡NLRP3基因SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR可以检测FAdV-4感染鸡不同组织中NLRP3的转录水平;致病性FAdV-4感染所造成的组织炎症损伤与NLRP3分子密切相关.

关键词

禽腺病毒血清4型/鸡NLRP3基因/实时荧光定量PCR/组织炎症/转录水平

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基金项目

国家自然科学基金(31772771)

出版年

2021
畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.729
ISSN：0366-6964
被引量3
参考文献量3
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