首页|利用流式细胞仪建立牦牛X、Y精子分选体系的研究

利用流式细胞仪建立牦牛X、Y精子分选体系的研究

The Establishment of X,Y Sperm Sorting System in Yak by Flow Cytometer

扫码查看
原文链接
  • 国家科技期刊平台
  • NETL
  • NSTL
  • 万方数据
  • 维普
旨在探索与优化牦牛精子分选条件,建立高效的牦牛X、Y精子分选技术体系.本研究制备了牦牛精液细胞悬液,采用不同量的DNA染料Hoechst33342和诱惑红共孵育精子细胞.利用流式细胞仪分选牦牛X、Y精子,通过比较分选效率、分选后精子活力及发育潜能,优化分选条件.运用RT-PCR检测分选精子的纯度,利用精子分析系统检测分选后精子的活力.将分选后的精子与体外成熟的卵母细胞进行体外受精,统计分选后精子的发育潜力,并采用SRY片段的PCR法检测早期胚胎的性别.结果显示,10 μL Hoechst33342染色40 min后的分选效果最佳,其分选产物的准确度和分选效率显著优于其他组,分选后的X、Y精子活力与20 μL Hoechest33342染色20 min组相当,显著高于其他组(P＜0.05).添加5 μmol·L-1的诱惑红对分选的纯度无显著影响(P＞0.05),但能显著提高分选后精子的活力(P＜0.05).分选后X、Y精子分别与卵母细胞进行体外受精,受精率和囊胚形成率与未分选组差异不显著(P＞0.05),且胚胎性别比例与分选后精子纯度吻合.综上,本研究建立并优化了流式细胞仪分选牦牛X、Y精子的方法,添加诱惑红有助于改善分选后牦牛精子的活力,为后期牦牛性控精液的制备及生产奠定了基础.

熊显荣、张雁、熊燕、闵星宇、吴锦波、郝振宇、张贺、李键

展开 >

西南民族大学畜牧兽医学院,成都610041

青藏高原动物遗传资源保护与利用国家教育部重点实验室,成都610041

四川省阿坝州畜牧科学研究所,阿坝623000

牦牛 流式细胞仪 分选 精子活力 胚胎性别

国家"十三五"重点研发专项西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金项目

2018YFD05023042020PTJS15005

2021

10.11843/j.issn.0366-6964.2021.02.012

畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.729
ISSN：0366-6964
年,卷(期)：2021.52(2)
  • 5
  • 1