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CnAβ基因对大鼠RBL-2H3细胞脱颗粒的影响

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过敏是人和养殖动物常见的疾病,而且发生的频率呈现逐渐增加的趋势.为了深入了解过敏反应的机制,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建钙调磷酸酶A beta(calcineurin A beta,CnAβ)基因敲除的大鼠RBL-2H3细胞株,并探讨CnAβ基因对RBL-2H3细胞生长及脱颗粒的影响.选取大鼠CnAβ基因第一外显子为敲除靶点,设计并合成3个单导向RNA(single guide RNA,sgRNA),构建pX459-CnAβ-sgRNA质粒,并用脂质体3000将构建好的质粒转染到RBL-2H3细胞内;利用嘌呤霉素对转染细胞进行筛选,通过DNA测序验证获得CnAβ基因敲除的RBL-2H3细胞株;并检测CnAβ基因缺失对细胞增殖和脱颗粒的影响.结果表明,成功构建了CnAβ单基因敲除的大鼠RBL-2H3细胞株;CnAβ基因缺失对RBL-2H3细胞增殖、细胞的颗粒形成以及颗粒含量无显著影响,但显著抑制由细胞表面受体介导的RBL-2H3细胞脱颗粒作用.该研究结果有助于深入了解动物过敏性疾病的发生机制,为动物过敏性疾病的预防提供了理论基础.
Effect of CnAβ Gene on Degranulation of Rat RBL-2H3 Cells

李艳红、刘洁、吴正理

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西南大学水产学院淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室,重庆400715

肥大细胞 RBL-2H3细胞 CRISPR/Cas9 基因敲除 脱颗粒

国家自然科学基金国家自然科学基金重庆市基础科学与前沿技术研究专项

3177096531600716cstc2017jcyjAX0420

2021

10.11843/j.issn.0366-6964.2021.02.024

畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.729
ISSN：0366-6964
年,卷(期)：2021.52(2)
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