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猪类无精症缺失基因DAZL的cDNA全长克隆、组织表达和亚细胞定位

cDNA Full-length Cloning,Tissue Expression and Subcellular Location of DAZL Gene in Pig

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旨在获得猪类无精症缺失基因DAZL cDNA全长序列,阐明该基因的序列、mRNA组织表达模式、蛋白质结构特征及亚细胞定位情况.本研究以版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line,BMI)10月龄成年公猪为研究对象,屠宰收集组织样,利用RACE和RT-PCR技术获得DAZL基因cDNA全长序列;使用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测其mRNA多组织表达谱;在线分析蛋白质的结构特点和保守结构域;用体外细胞转染技术鉴定其在ST猪睾丸细胞中的定位.结果表明,BMI DAZL cDNA全长2 985 bp(KU705632),包含888 bp的CDS区,编码295个氨基酸(AOC89050);该基因位于猪13号染色体,含11个外显子.qPCR结果显示,DAZL mRNA在睾丸中特异高表达.生物信息学分析表明,猪DAZL蛋白含有哺乳动物RMP和DAZ同源区,无规则卷曲在二级结构中超过50％.进化分析表明,BMI DAZL氨基酸序列高度保守,与牛科的亲缘关系最为接近.pEGFP-C1-DAZL转染ST细胞后的荧光共定位结果显示,DAZL蛋白主要分布在细胞核中.本研究分别从DNA、mRNA和蛋白质层面阐明了 BMI DAZL基因的序列特征、表达、蛋白质结构和定位,为进一步研究DAZL在BMI精子发生方面的功能奠定基础.

王配、王丽娜、霍海龙、张霞、赵筱、王雪飞、霍金龙

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云南农业大学动物科学技术学院,昆明650201

云南农业职业技术学院,昆明650212

版纳微型猪近交系 类无精症缺失基因(DAZL) 基因克隆 cDNA末端快速克隆(RACE) 组织表达 亚细胞定位

320607333166063731460580316606502019FB039

2021

10.11843/j.issn.0366-6964.2021.03.012

畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.729
ISSN：0366-6964
年,卷(期)：2021.52(3)
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