摘要
旨在探索湖羊垂体中17β-羟类固醇脱氢酶12(HSD17B12)基因对垂体激素分泌的影响.本研究挑选体重相近(40 kg左右)且健康的性成熟湖羊公羊(9月龄)3只,采集垂体组织进行HSD17B12基因CDS区扩增及蛋白同源性分析,确定其CDS区序列.利用免疫组化分析HSD17B12在性成熟雄性湖羊垂体中的表达定位.体外分离湖羊垂体细胞,利用RNA干扰和细胞转染技术体外干扰HSD17B12,qPCR鉴定激素相关基因的表达水平,并利用流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡、周期等的变化.结果表明,HSD17B12基因CDS区长度为939 bp,并且在物种间保守性较高.此外,HSD17B12在湖羊垂体组织大部分细胞中均呈现阳性表达.在垂体细胞干扰HSD17B12后,可以造成细胞增殖效率显著降低(P＜0.05),细胞凋亡比率显著增加(P＜0.05),细胞周期发生显著改变(P＜0.05),且垂体促性腺激素合成相关基因FSHβ、LHβ和生长激素基因GH表达水平均显著降低(P＜0.05).结果提示,在湖羊垂体细胞中干扰HSD17B12的表达,可通过影响细胞增殖、周期和凋亡水平的变化而显著降低促性腺激素及生长激素的分泌.本研究初步证明了 HSD17B12基因在湖羊垂体中的重要作用,为进一步探索其中的作用机制提供一定的基础.
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