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过表达NR4A1促进山羊皮下脂肪细胞分化

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旨在克隆山羊N R4A1基因的CDS区序列,明确其组织和细胞表达模式,以及探究过表达N R4A1基因对山羊皮下脂肪细胞分化的影响.本试验利用双酶切法构建山羊过表达载体pcDNA3.1-NR4A1.以1周岁简州大耳羊(n=5)为试验动物.利用RT-PCR方法和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)技术克隆NR4A1基因编码区序列并明确其时空表达特性,再将山羊pcDNA3.1-NR4A1载体转染皮下脂肪细胞使NR4A1过表达,利用形态学方法检测过表达后脂滴聚集的变化,同时采用qPCR方法检测脂肪分化标志基因相对表达水平的变化.结果获得山羊N R4A1基因的编码区序列是1797 bp,编码598个氨基酸;N R4A1在山羊各组织中广泛表达,且在山羊背最长肌中的相对表达水平最高(P<0.01),在山羊皮下脂肪细胞分化60 h表达量最高(P<0.01);过表达NR4A1基因显著促进山羊皮下脂肪细胞的脂滴积累,并且显著提高C/EBPα、C/EBPβ、PPARγ、L PL、SREBP1和A P2的相对表达水平(P<0.05).NR4A1基因可能是山羊皮下脂肪细胞分化的正调控因子,且可能是协同脂肪分化标志基因的表达量来实现的.
Overexpression of NR4A1 Promotes Goat Subcutaneous Adipocytes Differentiation

崔胜、王永、朱江江、熊燕、林亚秋

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西南民族大学畜牧兽医学院,成都610041

青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部/四川省重点实验室,成都610041

山羊 NR4A1 克隆 过表达 皮下脂肪细胞

国家自然科学基金国家自然科学基金四川省应用基础研究计划重点项目

32072723319021542018JY0036

2021

10.11843/j.issn.0366-6964.2021.05.012

畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.729
ISSN：0366-6964
年,卷(期)：2021.52(5)
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