畜牧兽医学报2021，Vol.52Issue(5) ：1328-1336.DOI:10.11843/j.issn.0366-6964.2021.05.018

抗非洲猪瘟病毒单链抗体的构建、表达及活性鉴定

Construction ,Expression and Activity Identification of Anti-ASFV Single-Chain Antibody

王丽娟 石正旺 杨波 麻园 罗俊聪 万颖 宋锐 田宏 郑海学
畜牧兽医学报2021，Vol.52Issue(5) ：1328-1336.DOI:10.11843/j.issn.0366-6964.2021.05.018
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抗非洲猪瘟病毒单链抗体的构建、表达及活性鉴定

Construction ,Expression and Activity Identification of Anti-ASFV Single-Chain Antibody

王丽娟 1石正旺 1杨波 1麻园 1罗俊聪 1万颖 1宋锐 1田宏 1郑海学1
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作者信息

  • 1. 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室 OIE/国家口蹄疫参考实验室,兰州730046
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摘要

制备抗非洲猪瘟病毒(ASFV)猪源单链抗体(ScFv),并对其生物学活性进行鉴定,筛选出具有ASFV反应活性的猪源单链抗体(ScFv),为ASFV的诊断提供新的材料.采集ASFV感染康复猪的外周血,分离淋巴细胞,提取淋巴细胞总RNA,以此为模板通过PCR扩增得到猪源IgG重链可变区与轻链可变区基因,利用SOE-PCR技术扩增拼接得到猪源ScFv基因;构建pET-30a-ScFv表达载体,进行蛋白的表达与纯化,用ELISA和IFA鉴定ScFv抗体的反应活性.结果显示,成功扩增出猪源ScFv(VH-VLκ、VH-VLλ)基因,鉴定到1株与ASFV存在反应活性的ScFv(VH-VLλ11)抗体.结果表明,成功筛选到1株与ASFV存在反应活性的ScFv(VH-VLλ11)抗体,为ASFV诊断和防控提供了新型原材料.

关键词

非洲猪瘟病毒/SOE-PCR/单链抗体/诊断与防控

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基金项目

国家重点研发计划项目(2018YFC0840400)

出版年

2021
畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.729
ISSN：0366-6964
被引量2
参考文献量4
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