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褪黑素的添加减轻猪精原干细胞的氧化损伤

The Addition of Melatonin Reduces the Oxidative Damage of Pig Spermatogonial Stem Cells

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旨在研究褪黑素(melatonin,MT)对体外培养猪精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)的作用机制.本研究采集3头7日龄健康大白公猪睾丸,利用差速贴壁法获得SSCs.后经形态学观察、碱性磷酸酶染色、标记基因检测及免疫荧光染色鉴定后以SSCs作为试验材料,设置MT浓度梯度(0、50、250、500、1 000 μmol·mL-1)组处理SSCs,每组设3个重复(n=3),空白对照组加入0.1％DMSO处理,分别检测添加MT后猪SSCs的细胞活力、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量及凋亡基因表达变化.结果显示:1)分离的克隆团细胞具有SSCs的生长特性,可被碱性磷酸酶染色并表达干细胞标志基因OCT4、SOX2和SSCs标志基因NANOG、PLZF、UCHL 1;2)50 μmol·mL-1以上的MT在处理48 h后可显著提高SSCs的细胞活力(P＜0.05);3)MT可显著降低猪SSCs内ROS水平(P＜0.05),极显著增加细胞内GSH含量(P＜0.01);4)MT可显著抑制猪SSCs内凋亡蛋白Bax和Caspase3的表达(P＜0.05).MT具有清除猪SSCs中的ROS,提高总GSH含量,抑制凋亡基因表达进而提高细胞活力的作用,可为养殖过程中提高公猪繁殖性能提供参考.

黄诚彧、徐德全、冯哲、周玲、刘敏

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华中农业大学动物医学院,武汉430070

农业部猪遗传育种重点开放实验室,武汉430070

农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,武汉430070

精原干细胞 分离鉴定 褪黑素 氧化损伤 细胞活力 细胞凋亡

2662020DKPY0032016ZX080060022018skjcx01

2021

10.11843/j.issn.0366-6964.2021.07.011

畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.729
ISSN：0366-6964
年,卷(期)：2021.52(7)
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