畜牧兽医学报2021，Vol.52Issue(7) ：1975-1982.DOI:10.11843/j.issn.0366-6964.2021.07.019

反刍动物埃立克体荧光定量PCR检测技术的建立和应用

Establishment and Application of Real-time PCR Assays for Detection of Ehrlichia ruminantium

王素华 王忠才 黄凌哲 莫虹斐 吴绍强 吕继洲 赵治国 帅江冰
畜牧兽医学报2021，Vol.52Issue(7) ：1975-1982.DOI:10.11843/j.issn.0366-6964.2021.07.019
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反刍动物埃立克体荧光定量PCR检测技术的建立和应用

Establishment and Application of Real-time PCR Assays for Detection of Ehrlichia ruminantium

王素华 1王忠才 1黄凌哲 1莫虹斐 2吴绍强 3吕继洲 3赵治国 4帅江冰2
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作者信息

  • 1. 温州海关综合技术服务中心,温州325027
  • 2. 杭州海关技术中心,杭州310012
  • 3. 中国检验检疫科学研究院动物检疫所,北京100029
  • 4. 呼和浩特海关技术中心,呼和浩特010020
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摘要

为快速、准确地检测反刍动物埃立克体,本研究以反刍动物埃立克体pCS20为靶基因设计特异性引物和探针,建立了 TaqMan和Eva Green荧光定量PCR方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与OIE推荐的套式PCR方法一起对临床样品进行检测.结果显示,本方法特异性强,与牛巴贝斯虫、牛双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫、犬埃立克体、牛埃立克体、马埃立克体和立氏埃立克体无交叉反应;TaqMan和Eva Green荧光定量PCR对pCS20质粒标准品的最低检测限分别为17.4拷贝·μL-1和1.74拷贝·μL-1,标准曲线相关系数大于0.99,组内和组间CV均小于1.5％.对420只钝眼蜱样本的检测显示,TaqMan和Eva Green荧光定量PCR的检出率分别为25.48％和29.29％,与套式PCR检测方法相比,敏感性更高.本研究为反刍动物埃立克体的检测和流行病学调查提供了一种快速、准确的检测方法.

关键词

反刍动物埃立克体/pCS20基因/TaqMan荧光定量PCR/Eva/Green荧光定量PCR

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基金项目

出版年

2021
畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.729
ISSN：0366-6964
被引量1
参考文献量1
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