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BCG诱导RAW264.7细胞脂肪酸氧化对细胞自噬和促炎因子表达的调控作用

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旨在探究脂肪酸氧化(fatty acid oxidation,FAO)对BCG介导的RAW 264.7细胞自噬和促炎因子表达的调控作用.用BODIPY染色和游离脂肪酸定量试剂盒检测BCG感染后RAW264.7细胞中脂滴聚集情况以及脂肪酸含量;Western blot检测BCG感染对肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT-1A)表达的影响;Etomoxir(100 μmol·L-1)预处理细胞2h后,BCG感染细胞6h,检测RAW264.7细胞中BCG存留量,并用Western blot方法检测自噬相关蛋白(Beclin1、LC3-Ⅱ)和溶酶体蛋白(Rab7)的表达情况;用免疫荧光方法和mRFP-GFP-LC3荧光双标腺病毒分别检测自噬小体聚集和自噬流;荧光定量PCR和ELISA分别检测促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达情况以及在细胞培养上清中的含量.结果 显示,BCG感染促进RAW264.7细胞中脂滴聚集和CPT-1A的表达,而游离脂肪酸含量降低;Etomoxir预处理抑制了细胞中BCG存活,并上调了Beclin1、LC3-Ⅱ和Rab7表达,且细胞中出现大量自噬小体聚集,自噬流增强,却抑制了促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达与分泌.综上表明,抑制FAO可促进BCG感染诱导的RAW264.7细胞自噬,并抑制BCG感染引起的炎症反应.
The Effect of BCG-induced RAW264.7 Cells Fatty Acid Oxidation on Autophagy and Pro-inflammatory Cytokines Expression

骆佳、徐金瑞、李武、王玉炯

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西部特色资源保护与利用教育部重点实验室,银川750021

宁夏大学生命科学学院,银川750021

BCG FAO RAW264.7巨噬细胞 细胞自噬 炎性反应

国家自然科学基金国家自然科学基金国家自然科学基金宁夏回族自治区重点研发计划

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2021

畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.729
ISSN:0366-6964
年,卷(期):2021.52(9)
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