畜牧兽医学报2021，Vol.52Issue(10) ：2783-2791.DOI:10.11843/j.issn.0366-6964.2021.010.009

猪RNA聚合酶Ⅱ单克隆抗体的制备与应用

Preparation and Application of Monoclonal Antibody of Porcine RNA Polymerase Ⅱ

田小欢 刘茹 孙艳 任瑞敏 余梅 赵书红 曹建华
畜牧兽医学报2021，Vol.52Issue(10) ：2783-2791.DOI:10.11843/j.issn.0366-6964.2021.010.009
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猪RNA聚合酶Ⅱ单克隆抗体的制备与应用

Preparation and Application of Monoclonal Antibody of Porcine RNA Polymerase Ⅱ

田小欢 1刘茹 1孙艳 1任瑞敏 1余梅 2赵书红 2曹建华2
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作者信息

  • 1. 华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,武汉430070;华中农业大学农业农村部猪遗传育种重点实验室,武汉430070
  • 2. 华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,武汉430070;华中农业大学农业农村部猪遗传育种重点实验室,武汉430070;华中农业大学生猪健康养殖协同创新中心,武汉430070
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摘要

旨在制备猪RNA聚合酶Ⅱ的单克隆抗体并进行初步应用.本研究采用生物信息方法预测免疫原,将其化学合成后免疫5只4～8周龄Bal b/c雌性小鼠,对免疫后呈现阳性的小鼠进行细胞融合试验,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合并获得能稳定分泌抗RNA PolⅡ的杂交瘤细胞.鉴定结果显示,RNA PolⅡ单克隆抗体的重链为IgG 2A型,轻链为Kappa型.利用间接ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选和亚克隆,获得了 8株稳定分泌RNA PolⅡ单克隆抗体的杂交瘤细胞株.将其初步应用到染色质免疫共沉淀(ChIP-seq)技术,并与商业化抗体的富集性进行比较,结果表明,本研究得到的单克隆抗体富集性更强.本研究获得的猪RNA PolⅡ单克隆抗体可为表观遗传学的研究提供理论基础,并且提供重要的生物学材料.

关键词

RNA/PolⅡ/单克隆抗体/猪/杂交瘤细胞

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基金项目

国家自然科学基金(31772563)

武汉市应用基础前沿项目(2020020601012255)

出版年

2021
畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.729
ISSN：0366-6964
参考文献量26
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