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猪RNA聚合酶Ⅱ单克隆抗体的制备与应用

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旨在制备猪RNA聚合酶Ⅱ的单克隆抗体并进行初步应用.本研究采用生物信息方法预测免疫原,将其化学合成后免疫5只4～8周龄Bal b/c雌性小鼠,对免疫后呈现阳性的小鼠进行细胞融合试验,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合并获得能稳定分泌抗RNA PolⅡ的杂交瘤细胞.鉴定结果显示,RNA PolⅡ单克隆抗体的重链为IgG 2A型,轻链为Kappa型.利用间接ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选和亚克隆,获得了 8株稳定分泌RNA PolⅡ单克隆抗体的杂交瘤细胞株.将其初步应用到染色质免疫共沉淀(ChIP-seq)技术,并与商业化抗体的富集性进行比较,结果表明,本研究得到的单克隆抗体富集性更强.本研究获得的猪RNA PolⅡ单克隆抗体可为表观遗传学的研究提供理论基础,并且提供重要的生物学材料.
Preparation and Application of Monoclonal Antibody of Porcine RNA Polymerase Ⅱ

田小欢、刘茹、孙艳、任瑞敏、余梅、赵书红、曹建华

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华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,武汉430070

华中农业大学农业农村部猪遗传育种重点实验室,武汉430070

华中农业大学生猪健康养殖协同创新中心,武汉430070

RNA PolⅡ 单克隆抗体 猪 杂交瘤细胞

国家自然科学基金武汉市应用基础前沿项目

317725632020020601012255

2021

10.11843/j.issn.0366-6964.2021.010.009

畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.729
ISSN：0366-6964
年,卷(期)：2021.52(10)
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