旨在探讨牛分枝杆菌疫苗株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1细胞后内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)对细胞焦亡的调控作用及分子机制.在BCG单独感染THP-1细胞或与ERS抑制剂TUDCA共处理细胞后,采用qRT-PCR检测ERS标志性分子GRP78,细胞焦亡标志性分子GSDMD、Caspase1、NLRP3、IL-1β和 IL-18在 mRNA 水平的表达,采用 Western blot 检测 GRP78、Caspase12、GSD-MD、Caspase1和NLRP3在蛋白水平的表达,采用ELISA检测IL-1β和IL-18的释放量,采用CCK-8检测细胞存活率.结果表明:在BCG单独感染THP-1细胞不同时间后,GRP78在mRNA水平和蛋白水平的表达均随感染时间延长而升高(P＜0.01),GSDMD蛋白表达在24 h达到最高,IL-1β 和IL-18在mRNA水平的表达呈时间依赖性(P＜0.01).在BCG单独感染或与TUDCA共同作用细胞24 h后,与未感染对照组相比,BCG感染组GRP78、GS-DMD、Caspase1、NLRP3、IL-1β和 IL-18 mRNA 水平表达上调(P＜0.05),GRP78、Caspase12、GSDMD、Caspase1 和NLRP3蛋白水平表达上调(P＜0.001),IL-1β和IL-18的浓度增加(P＜0.01),细胞存活率下降(P＜0.001),而经TUDCA预处理的BCG感染组与BCG单独感染组相比,以上分子的表达下降,细胞存活率上升(P＜0.01).综上表明,在BCG感染THP-1细胞后,引起的ERS对细胞焦亡具有调控作用.
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