摘要
本试验旨在研究高浓度葡萄糖对牛肺泡巨噬细胞(BAMs)促炎细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α释放的影响及其机制是否与RAGE-TLR4相关信号通路串扰有关.将BAMs随机分为正常糖组(NG)、高糖组(HG)、高糖+RAGE抑制剂组(H+F)、高糖+TLR4抑制剂组(H+T)及DMSO组,处理12 h后收集上清及下层细胞.采用qRT-PCR 和 Western blot 检测细胞 RAGE、TLR4、MyD88、NF-κB p65的 mRNA 及蛋白表达情况,ELISA 检测上清TNF-α、IL-1β、IL-6浓度.结果表明,高糖极显著上调RAGE、TLR4、MyD88和NF-κB p65基因、蛋白表达水平以及上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α浓度(P＜0.01);RAGE抑制剂与TLR4抑制剂均极显著抑制高糖引起的RAGE、TLR4、MyD88和 NF-κB p65基因、蛋白表达水平上调以及 IL-1β、IL-6、TNF-α 释放(P＜0.01),即 RAGE与TLR4均在激活RAGE/TLR4/MyD88/NF-κB炎症信号通路中发挥调控作用.综上所述,高糖能够通过RAGE-TLR4串扰引起牛肺泡巨噬细胞释放促炎细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α,进一步阐明了高糖促进牛肺泡巨噬细胞炎症反应的分子机制.
基金项目
四川省科技计划项目(2018 NZ0002)
四川省科技计划项目(2019YFQ0012)
国家重点研发计划项目(2018YFD0501800)
国家现代农业产业技术体系四川肉牛创新团队项目(SCCXTD-2020-13)
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