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绵羊miR-200b对卵泡颗粒细胞周期和凋亡的影响

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旨在揭示miR-200b在绵羊卵泡颗粒细胞的作用.本研究利用在线工具(TargetScan、miRTarBase及miRDB)预测miR-200b的靶基因,并利用KOBAS对其进行GO和KEGG通路富集分析.将分离培养的绵羊卵泡颗粒细胞分为4组,分别转染miR-200b mimic、mimic NC、miR-200b inhibitor和inhibitor NC,每组6个重复.采用CCK8法分别检测转染24、48和72 h颗粒细胞的存活率;采用荧光定量PCR检测miR-200b、CDK4、CDK6、CC-ND1、CCND2、Bax和Bcl-2基因的表达水平.利用3种在线工具预测到25个miR-200b的共同靶基因,GO和KEGG通路富集分析发现这些基因富集在细胞的增殖分化、细胞周期及生殖发育过程;转染miR-200b mimic、miR-200b inhibitor和NC后,颗粒细胞存活率随时间延长呈"V"型趋势降低,且48 h达最低(P＜0.01);miR-200b in-hibitor与inhibitor NC组相比,miR-200b表达量无显著差异(P＞0.05);与mimic NC相比,miR-200b mimic组极显著促进miR-200b表达(P＜0.001),显著下调CDK4(P＜0.01)、CDK6(P＜0.001)和CCND1(P＜0.001)、CCND2(P＜0.05)和Bcl-2(P＜0.01)基因表达水平,Bax表达并无显著变化(P＞0.05),且极显著下调Bcl-2与Bax比值(P＜0.001).综上所述,miR-200b抑制绵羊卵泡颗粒细胞细胞周期和增殖并促进其凋亡.
Effects of Ovine miR-200b on Cell Cycle and Apoptosis of Follicular Granulosa Cells

宋鹏琰、锡建中、张振红、付强、岳巧娴、张配颖、周荣艳

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河北农业大学动物科技学院,保定071001

miR-200b 细胞周期 凋亡 颗粒细胞 绵羊

河北省研究生创新项目河北农业大学精准畜牧学科群建设项目河北省自然科学基金

CXZZBS201909210900642019204039

2021

10.11843/j.issn.0366-6964.2021.012.014

畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会

畜牧兽医学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.729
ISSN：0366-6964
年,卷(期)：2021.52(12)
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