摘要
CRISPR/Cas9 技术在植物的基础研究以及谷物的遗传改造方面展现出了前所未有的潜力.目前植物基因编辑方法大多是基于农杆菌介导的遗传转化,该方法不仅涉及转基因过程,容易引发公众关注,同时该方法对较难转化的植物而言有一定的技术挑战.研究开发了一个简单的非转基因植物基因编辑方法,即采用病毒递送的方式将片段化的Cas9 和gRNA运送到烟草中.为了适应马铃薯病毒X载体的运载能力,将金黄色葡萄球菌SaCas9 分成 3个部分,用 2 个片段化的内含肽将其连接成完整的Cas9 蛋白.结果表明:在培养的细胞和植物叶片中,2 个片段化的内含肽均能使 3 个片段化的Cas9 重组为完整的Cas9 蛋白.将 3 个片段化的载体和 1 个 sgRNA载体注射到叶片中,能对PDS 基因进行靶向编辑.该非转基因的植物基因编辑方法可能对其他多种植物有一定的应用效果.
基金项目
重庆市科技局英才计划"包干制"项目(cstc2021ycjhbgzxm0005)
西南大学博士启动基金(SWU120012)
NETL
NSTL
维普
万方数据