西南大学学报(自然科学版)2023,Vol.45Issue(11) :96-105.DOI:10.13718/j.cnki.xdzk.2023.11.010

基于SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术检测烟草靶斑病发病菌量

Using SYBR Green Ⅰ Real-Time Quantitative PCR System for Detection of Rhizoctonia solani

李凤巍 裴悦宏 张晓枫 王智 陈海涛 徐宸 冉茂 孙现超
西南大学学报(自然科学版)2023,Vol.45Issue(11) :96-105.DOI:10.13718/j.cnki.xdzk.2023.11.010

基于SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术检测烟草靶斑病发病菌量

Using SYBR Green Ⅰ Real-Time Quantitative PCR System for Detection of Rhizoctonia solani

李凤巍 1裴悦宏 1张晓枫 1王智 2陈海涛 3徐宸 3冉茂 3孙现超1
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作者信息

  • 1. 西南大学 植物保护学院,重庆 400715
  • 2. 中国烟草总公司重庆市公司石柱分公司,重庆 409100
  • 3. 中国烟草总公司重庆市公司烟叶分公司,重庆 400020
  • 折叠

摘要

本研究根据烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)与烟草赤星病菌(Alternaria alternata)、烟草棒孢霉叶斑病菌(Corynespora cassiicola)等田间常见烟草叶部病害病原菌的 rDNA-ITS(ribosomal DNA Internal Transcribed Spac-ers,rDNA-ITS)序列差异位点,设计一对特异性检测引物 RSW1 F/RSW2 R,建立烟草靶斑病菌实时荧光定量 PCR(Real time fluorescence quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-qPCR)快速准确检测体系,并分析烟草靶斑病最低发病菌量.结果表明,设计的引物特异性良好,灵敏度达到 1×10-3 ng/μL.利用已获得的实时荧光定量 PCR体系计算得出引起烟草靶斑病发病的最低菌量为 12.03 pg/μL.此外,对重庆龚滩地区烟叶中烟草靶斑病菌含量进行计算,发现土壤以及周边杂草可能为该地区烟草靶斑病菌的侵染来源,并进一步确定该地区预防烟草靶斑病的最佳时期为 5 月 15 日至 6 月 15 日,为烟草靶斑病菌的田间预警预报及流行提供理论依据.

关键词

烟草/烟草靶斑病/实时荧光定量PCR

Key words

tobacco/tobacco target spot/RT-qPCR

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基金项目

国家自然科学基金(31870147)

中国烟草总公司重庆市公司科技项目(B20212NY2312)

中国烟草总公司重庆市公司科技项目(B20221 NY1307)

中国烟草总公司重庆市公司科技项目(B20211-NY1315)

广西中烟工业有限责任公司项目(2021450000340029)

出版年

2023
西南大学学报(自然科学版)
西南大学学报编辑部

西南大学学报(自然科学版)

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.825
ISSN:1673-9868
参考文献量27
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