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AAT基因转化杂交构树叶片组培筛选研究

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为了提高杂交构树的组培效率,以蒺藜苜蓿为研究对象,进行生物信息分析,克隆蒺藜苜蓿目的基因AAT,构建表达载体,通过农杆菌转化方法将目的载体转入杂交构树组培叶片中,优化组培相关体系配比,抗生素筛选配比,RT-PCR和定量PCR检验重组植株.结果表明:最佳灭菌体系为75％乙醇消毒20 s,0.3％HgCl2消毒15 min,污染率低,成活率高;最佳愈伤期激素配比为6-BA 2.5 mg/L、NAA 0.2 mg/L,最佳壮苗期激素配比为6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.2 mg/L.最佳筛选抗生素配比为噻孢霉素(Cef)300 mg/L、潮霉素(Hyg)7.5 mg/L;通过RT-PCR验证试验结果,并通过定量PCR测定AAT基因表达含量,重组植株与野生型相比提高2.5倍.试验首次建立了重组载体遗传转化杂交构树,对叶片组培及筛选方法具有重要意义.
Tissue Culture Screening of AAT Gene Transformed Leaves of Hybrid Broussonetia papyrifera

谢晓阳、魏磊、王伟、景炳年、陈谭星、颜慧萍、曹力凡、常霞、高正龙

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河南省生物技术开发中心 河南省科学院天然产物重点实验室, 河南 郑州 450002

河南省高新技术实业有限公司, 河南 郑州 450002

杂交构树 载体构建 组织培养 AAT基因 遗传转化

河南省科学院重大科研项目聚焦专项

190114002

2021

10.16473/j.cnki.xblykx1972.2021.01.004

西部林业科学
云南省林业科学院 云南省林学会

西部林业科学

CSTPCD北大核心
影响因子：0.807
ISSN：1672-8246
年,卷(期)：2021.50(1)
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