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利用多重连接探针扩增结合熔解曲线法鉴别人参与西洋参中掺杂的研究

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目的:针对人参和西洋参饮片中相互掺杂问题建立快速检测鉴别方法.方法:依据多重连接探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术检测序列单核苷酸多态性(SNP)和点突变的原理,针对人参与西洋参的18S序列寻找SNP位点;设计特异性探针进行MLPA扩增,并由熔解曲线形成的熔解曲线峰得出熔解温度(melting temperature,Tm),根据Tm值的差异来鉴别人参与西洋参,并进行特异性、灵敏度、掺伪比实验,验证方法的可行性.结果:人参探针的特异性熔解曲线Tm值为(79.3±0.2)℃,西洋参探针的熔解曲线Tm值为(81.2±0.2)℃.当西洋参探针与人参探针比例为0.6∶1.0时,人参掺杂10％的西洋参,或者西洋参中掺杂10％的人参均可被有效检出.结论:本研究建立了稳定的人参与西洋参掺伪鉴别方法,该方法具有特异性强,灵敏度高的特点.
Identification of mutual adulteration of Panax ginseng and Panax quinquefolius by multiplex ligation-dependent probe amplification combined with melting curve method

王文斌、莫静、胡志刚、杜巍、汪波

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湖北省药品监督检验研究院,国家药品监督管理局中药质量控制重点实验室,武汉430075

湖北中医药大学,武汉430065

湖北大学生命科学学院,武汉430062

武汉大学生命科学学院,武汉430072

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多重连接探针扩增技术 熔解曲线 人参 西洋参 掺伪 鉴别

湖北省青年拔尖人才培养计划湖北省科技重大专项湖北省自然科学基金重点类项目中国食品药品检定研究院项目

2020ACA0072020CFA024TCM2021-YJ11

2022

10.16155/j.0254-1793.2022.09.11

药物分析杂志
中国药学会

药物分析杂志

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.039
ISSN：0254-1793
年,卷(期)：2022.42(9)
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