摘要
为了探究热毒宁注射液(Reduning injection,RI)抗甲型流感病毒的作用及其机制,本研究在A549和MDCK 细胞上采用 CCK-8(cell counting kit-8)法检测药物细胞毒性;采用 Western blot 和 CPE(cytopathic effect)方法检测RI对病毒蛋白、细胞病变和病毒毒力的影响评价其药效;Western blot法检测血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)的蛋白水平、转录因子NF-E2相关因子 2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)核转运、P38 MAPK(mitogen-activated protein kinases)和 ERK1/2(extracellular signal-regulated kinases 1/2)磷酸化;实时荧光定量PCR检测IFN-α/β(interferon-α/β)mRNA含量;双荧光素酶报告基因检测Nrf2的转录活性.结果显示,RI剂量依赖性地抑制流感病毒诱导的MDCK细胞病变,降低流感病毒M2蛋白水平和病毒毒力,具有明确的抗流感病毒作用;促进P38 MAPK和ERK1/2的磷酸化并激活Nrf2核转录因子活性,促进细胞核内Nrf2蛋白表达,从而上调HO-1蛋白表达,最终增加IFN-α/βmRNA水平.综上,本研究表明,RI通过激活MAPK/Nrf2/HO-1信号通路发挥抗流感病毒作用,揭示了 RI抗流感病毒新的作用机制,为其临床治疗流感病毒提供了理论依据.
基金项目
国家自然科学基金青年科学基金资助项目(8220131872)
中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(2021-I2M-1-048)
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