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多重连接探针扩增技术鉴别半夏及其常见混伪品

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目的 基于多重连接探针扩增技术(MLPA)建立一种中药材半夏与其常见伪品虎掌、滴水珠的分子鉴定方法,为半夏药材质量控制提供依据.方法 从Genbank数据库下载半夏属核基因组内转录间隔区(ITS)序列,利用MEGA 6.05版软件进行序列比对,依据半夏、虎掌及滴水珠ITS序列中的单核苷酸多态性(SNP)位点设计物种特异性MLPA探针,MLPA反应后采用熔解曲线法对扩增产物进行分析.结果 半夏、虎掌和滴水珠样品DNA与物种特异性MLPA探针可分别产生位于84.84,82.76及80.14℃的单一熔解峰,表明探针具有良好特异性;构建的探针体系可对0.1 ng模板DNA进行检测,并可有效检出半夏中掺混1％的虎掌或滴水珠样品.对市场收集样品进行检测,鉴别结果准确,灵敏度高.结论 该研究建立的多重连接探针扩增方法可准确鉴别半夏和虎掌、滴水珠,具有特异性强、灵敏度高等特点,可为半夏药材质量控制提供技术支持.
Authentication of Pinellia ternate and Its Common Adulterants by Multiplex Ligation- dependent Probe Amplification

莫静、王文斌、程华春、李小芳、刘红、汪波

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湖北省药品监督检验研究院,武汉 430075

国家药品监督管理局中药质量控制重点实验室,武汉 430075

湖北大学生命科学学院,武汉 430062

湖北中医药大学药学院,武汉 430065

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半夏 虎掌 滴水珠 多重连接探针扩增技术 中药材鉴定

湖北省青年拔尖人才培养计划&&中国食品药品检定研究院项目

2020ACA007TCM2021-YJ11

2023

10.3870/j.issn.1004-0781.2023.03.006

医药导报
中国药理学会 华中科技大学同济医学院附属同济医院 中国医药商业协会

医药导报

CSTPCD北大核心
影响因子：1.042
ISSN：1004-0781
年,卷(期)：2023.42(3)
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