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多重连接探针扩增-高分辨熔解法鉴别鸡血藤及其常见混伪品

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目的 采用分子生物学技术鉴别鸡血藤及其常见3种混伪品.方法 根据4个物种核基因组内转录间隔区2(ITS2)序列差异设计特异性探针,结合运用多重连接探针扩增(MLPA)技术与高分辨熔解(HRM)曲线技术,根据特异性探针熔解温度(Tm)差异鉴别鸡血藤及其常见混伪品大血藤、白花油麻藤、香花鸡血藤.结果 4个物种特异性探针Tm值分别为:鸡血藤(87.0±0.2)℃、大血藤(82.8±0.2)℃、白花油麻藤(85.4±0.2)℃、香花鸡血藤(80.1±0.2)℃.探针特异性考察中,交叉反应与空白组均未产生熔解峰,表明探针具有良好特异性.构建的方法可用于1.0 ng模板DNA的检测,并可有效检出鸡血藤中掺混5％大血藤、白花油麻藤或香花鸡血藤.结论 基于MLPA-HRM技术建立的鸡血藤及其混伪品鉴别方法灵敏度高,特异性强,稳定性好,可有效解决市场上鸡血藤药材植物来源复杂、混伪品难以鉴别的问题.
Identification of Spatholobus suberectus and Its Common Adulterants by MLPA-HRM Assay

王咏懿、莫静、王文斌、程华春、李小芳、汪波

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中国药科大学药学院,南京 211112

湖北省药品监督检验研究院,武汉 430075

湖北大学生命科学学院,武汉 430062

湖北中医药大学药学院,武汉 430065

国家药品监督管理局中药质量控制重点实验室,武汉 430075

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鸡血藤 混伪品 多重连接探针扩增技术 高分辨熔解曲线 鉴别

湖北省青年拔尖人才培养计划&&中国食品药品检定研究院项目

2020ACA007TCM2021-YJ11

2023

10.3870/j.issn.1004-0781.2023.03.008

医药导报
中国药理学会 华中科技大学同济医学院附属同济医院 中国医药商业协会

医药导报

CSTPCD北大核心
影响因子：1.042
ISSN：1004-0781
年,卷(期)：2023.42(3)
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