摘要
目的:研究肺炎克雷伯菌kbvR调控子在调控细菌抗巨噬细胞吞噬功能及致病性中的作用.方法:通过小鼠腹腔感染肺炎克雷伯菌野生株(WT)、kbvR基因敲除株(△kbvR)及kbvR基因回补株(C-kbvR),分析不同菌株腹腔感染LD50及小鼠存活率,同时获取小鼠肺与肝脏进行组织病理检查.腹腔感染不同菌株12 h时取小鼠血液和腹腔灌洗液进行细菌计数及涂片染色镜检,分析腹腔巨噬细胞对不同菌株的吞噬杀菌能力.体外将巨噬细胞RAW264.7与带有GFP质粒的肺炎克雷伯菌共同孵育,激光共聚焦显微镜观察细菌对巨噬细胞的黏附能力.结果:BALB/c小鼠腹腔感染肺炎克雷伯菌野生株、kbvR敲除株、kbvR回补株的LD50分别为≈500 cfu,>5×105 cfu,≈1000 cfu.△kbvR感染小鼠存活率明显高于野生株,肝脏病理分析发现野生株感染小鼠肝脏出现炎性细胞浸润及炎性病灶形成,肺部病理分析发现野生株感染小鼠肺部出现淤血.而缺失株感染小鼠肝脏、肺部无明显病理变化.腹腔感染12 h后野生株感染小鼠血液中检测到肺炎克雷伯菌,而敲除株未能检测到;腹腔灌洗液涂片染色镜检在野生株感染的腹腔灌洗液中检测到大量细菌,而敲除株未能观察到,说明当kbvR基因缺失后体内抵抗腹腔巨噬细胞吞噬杀菌能力降低.体外共培养发现肺炎克雷伯菌敲除株黏附能力明显增强,说明kbvR基因可以通过调控细菌对巨噬细胞的黏附而影响巨噬细胞对细菌的吞噬能力.结论:kbvR基因可以通过调控细菌抗巨噬细胞吞噬杀菌能力而影响细菌的致病性.
基金项目
湖北省科技厅杰出青年人才项目(2018CFA046)
湖北医药学院人才启动金项目(2017QDJZR16)
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