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灰毡毛忍冬LmPAL1基因的克隆及表达分析

Cloning and expression analysis of phenylalanine ammonia-lyase gene in Lonicera macranthoides

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目的 克隆灰毡毛忍冬苯丙氨酸解氨酶(LmPAL1)基因全长序列,并进行生物信息学和表达模式分析.方法 提取灰毡毛忍冬花总RNA,通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和RACE技术克隆LmPAL1基因的全长cDNA序列;运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用qRT-PCR测定灰毡毛忍冬茎、叶和不同花期花中该基因的相对表达量.结果 克隆的LmPAL1基因开放阅读框(ORF)长度为2 145bp,编码714个氨基酸,生物信息学分析预测为亲水性蛋白,定位于叶绿体中,包含PAL shielding结构域(527～641 aa),并且含有PAL/HAL活性中心序列GT兀TASGDLVPLSYIAG(196～212 aa),与其他LmPAL1具有较高的相似度;LmPALl基因qRT-PCR结果显示,7个花期材料以金黄色开花期相对表达量较高;与茎、叶比,白色花蕾期花的相对表达量最高,叶的最低.结论 成功克隆了LmPAL1基因,为进一步研究该基因的功能以及遗传改良灰毡毛忍冬品质奠定基础,同时为探究灰毡毛忍冬绿原酸生物合成和调节机制提供了依据.

陈勋、刘畅宇、陈娅、龙雨青、童巧珍、刘湘丹、周日宝

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湖南中医药大学药学院,湖南长沙410208

湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心,湖南长沙410208

灰毡毛忍冬 苯丙氨酸解氨酶(PAL) 基因克隆 生物信息学 表达分析

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81673546812030072017XF50442017JJ323716B1932017SK2124湘教通[2015] 351ZYBZH-Y-HUN-24校行科字[2018]3号

2019

中草药
天津药物研究院,中国药学会

中草药

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.632
ISSN：0253-2670
年,卷(期)：2019.50(1)
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