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僵蚕溶茧酶抑制剂的纯化与抗肿瘤活性研究

Research on purification of cocoonase inhibitor of Bombyx Batryticatus and its anti-tumor activity

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目的 分离纯化僵蚕溶茧酶抑制剂(Jiangcan cocoonase inhibitor,JCCI),研究其体内外对人肝癌SMCC-7721细胞增殖的抑制活性.方法 依次应用以家蚕溶茧酶为配体的亲和色谱、Sephadex G-50凝胶过滤色谱、Superdex 75快速蛋白液相色谱(fast protein liquid chromatography,FPLC),从僵蚕粗蛋白提取物的85％硫酸铵沉淀物中分离纯化JCCI.以Edman降解法测其N端氨基酸序列.应用MTT法与荷瘤裸鼠模型,检测其体内外抑制SMCC-7721细胞增殖与生长活性.结果 JCCI相对分子质量为13 973.63,其N端前10个氨基酸序列为VRNKRQSNDD.抑制剂动力学分析结果表明,JCCI是溶茧酶的非竞争性抑制剂,米氏常数(Km)平均值为76.50,二者物质的量之比为1 ∶ 1.JCCI可显著抑制SMCC-7721肝癌细胞体外增殖与体内荷瘤裸鼠的肿瘤生长,体外给药36 h的半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)为260.52 μg/mL,JCCI抑制率与剂量线性相关.结论 JCCI是一种首次从僵蚕中分离纯化的具有抗肿瘤活性的丝氨酸蛋白酶抑制剂.

王厚伟、徐凌川、王家超、曾英姿、田景振、窦彦玲、王飞

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山东中医药大学智能与信息工程学院,山东济南 250355

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僵蚕 溶茧酶 丝氨酸蛋白酶抑制剂 抗肿瘤活性 肝癌 亲和色谱 荷瘤裸鼠 MTT法

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ZR2013HM0352016CYJS08A01-8201102021J11LF29

2022

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.07.011

中草药
天津药物研究院,中国药学会

中草药

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.632
ISSN：0253-2670
年,卷(期)：2022.53(7)
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