中文摘要： 目的 研究紫檀芪对脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用,并考察其对血管内皮间质过度转化与蛋白激酶B/糖原合成激酶-3β(protein kinase B/glycogen synthesizing kinase-3β,Akt/GSK-3β)通路的影响.方法 建立脑缺血再灌注大鼠模型,给予紫檀芪和硫酸氢氯吡格雷片干预6 d后,检测大鼠神经功能缺损程度;采用ELISA法检测各组大鼠血清血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)、血小板源性 CD40配体(CD40L)和血小板 P 选择素(P-slelctin,CD62P)水平;采用试剂盒检测各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;采用苏木素.伊红(HE)染色法观察各组大鼠脑皮质病理变化;采用免疫荧光染色法检测各组大鼠脑血管内皮和间质标志物血小板.内皮细胞黏附分子-1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PEC AM-1,又名 CD31)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达;采用Western blotting法检测各组大鼠脑血管CD31、α-SMA和脑皮质Akt和GSK-3β蛋白表达情况;采用免疫组化法检测各组大鼠脑皮质Akt和GSK-3β蛋白表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分显著升高(P＜0.05);血清PAF、CD40L和CD62P水平显著升高(P＜0.05);脑组织SOD活性显著降低,MDA水平升高(P＜0.05);脑皮质细胞形态破坏,呈空泡样坏死,细胞间隙增大,染色变浅,残存细胞体积缩小,细胞核固缩、深染,细胞边界不清;脑血管CD31表达减弱,α-SMA表达增强;脑血管CD31和脑皮质p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),脑血管α-SMA蛋白表达水平显著升高(P＜0.05).与模型组比较,各给药组大鼠神经功能缺损评分显著降低(P＜0.05);血清PAF、CD40L和CD62P水平降低(P＜0.05);脑组织SOD活性升高(P＜0.05),MDA水平降低(P＜0.05);脑皮质细胞形态、排列、细胞核清晰度以及间质染色均匀度等均改善;脑血管CD31表达增强,α-SMA表达减弱;脑血管CD31和脑皮质p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),脑血管α-SMA蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).结论 紫檀芪对脑缺血再灌注大鼠具有脑保护作用,可抑制血管内皮-间质过度转化,其作用机制可能与激活Akt/GSK-3β通路有关.
万方数据
