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清肺口服液黄酮类成分对呼吸道合胞病毒感染小鼠坏死性凋亡的影响

Effect of flavonoids in Qingfei Oral Liquid on necroptosis in RSV-infected mice

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目的 研究清肺口服液黄酮类成分对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠坏死性凋亡的影响.方法 将BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组及黄酮类成分低、高剂量(30、60mg/kg)组和利巴韦林(46mg/kg)组,建立RSV感染的小鼠模型,给药4d后,苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织病理学变化;qRT-PCR检测肺组织中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和 RSV-FmRNA 表达;流式细胞术检测肺组织细胞坏死性凋亡率;ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和高迁移率族蛋白 B1(high mobility group protein B1,HMGB1)水平;Western blotting 检测肺组织受体相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein 1,RIP1)、RIP3、混合系列蛋白激酶样结构域(mixed lineage kinase domain-like,MLKL)、磷酸甘油酸变位酶 5(phosphoglycerate mutase5,PGAM5)、动力相关蛋白 1(dynamin-related protein 1,DRP1)蛋白表达;免疫荧光检测肺组织RIP1和RIP3的共定位以及p-MLKL与上皮细胞的共定位.结果 与模型组相比,黄酮类成分组小鼠肺组织病理损伤减轻;肺组织中IL-6、TNF-α和RSV-FmRNA表达水平降低(P＜0.05、0.01);肺组织细胞坏死性凋亡率下降(P＜0.05、0.01);BALF中HMGB1和LDH水平降低(P＜0.05、0.01);肺组织RIP 1、RIP3、MLKL、PGAM5、DRP1蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05、0.01);肺组织RIP1/RIP3坏死复合物的形成减少,肺上皮细胞中p-MLKL的荧光表达降低.结论 清肺口服液黄酮类成分可能通过调节RIP1/RIP3/MLKL/PGAM5/DRP1信号通路,抑制坏死性凋亡,改善RSV感染的小鼠肺部炎症损伤.

凌晓颖、丁雅荔、陶嘉磊、袁斌

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南京中医药大学附属医院,江苏南京 210029

清肺口服液 黄酮类成分 呼吸道合胞病毒 坏死性凋亡 受体相互作用蛋白激酶1 受体相互作用蛋白激酶3 混合系列蛋白激酶样结构域 磷酸甘油酸变位酶5 线粒体动力相关蛋白1

国家中医药管理局项目国家自然科学基金国家自然科学基金江苏省研究生实践创新计划

2019XZZX-ek0038187334082174436KYCX21_1647

2022

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.13.015

中草药
天津药物研究院,中国药学会

中草药

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.632
ISSN：0253-2670
年,卷(期)：2022.53(13)
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