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基于E2F5研究强心苷类化合物21-hydroxy-neriaside抑制胃癌细胞增殖的作用机制

Mechanisms of cardiac glycoside monomeric compound 21-hydroxy-neriaside on inhibiting proliferation of gastric cancer cells based on E2F5

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目的 探究强心苷类单体化合物21-hydroxy-neriaside的抗胃癌作用及机制.方法 采用CCK-8法考察21-hydroxy-neriaside 对胃癌 HGC27、MGC803、GT0603 和 GT112 细胞增殖的影响;观察 21-hydroxy-neriaside 对 HGC27、MGC803、GT0603和GT112细胞形态的影响;考察21-hydroxy-neriaside对HGC27、GT0603和GT112细胞集落形成的影响;采用RNA测序探究21-hydroxy-neriaside抑制胃癌细胞增殖的可能机制;采用qRT-PCR验证RNA测序结果;考察shRNA-E2F转录因子 5(E2F transcription factor 5,E2F5)对 GT112 细胞 E2F5 表达的影响;采用 Western blotting 检测 21-hydroxy-neriaside 对HGC27、GT0603 和 GT112 细胞 E2F5、骨髓细胞瘤病毒癌基因(cellular-myelocytomatosis viral oncogene,c-Myc)、细胞周期Dl(Cyclin D1)、细胞周期E2(Cyclin E2)和剪切型聚腺昔酸二磷酸核糖转移酶[cleaved poly(ADP-ribose)polymerase,cleaved PARP]蛋白表达的影响.结果 CCK-8实验、形态学观察和细胞克隆形成实验均表明21-hydroxy-neriaside具有抑制胃癌细胞增殖的活性,与时间和药物浓度呈正相关.RNA测序、qRT-PCR和shRNA-E2F5慢病毒转染实验表明21-hydroxy-neriaside通过调控E2F5影响细胞周期通路,从而抑制肿瘤细胞生长.Western blotting实验结果表明21-hydroxy-neriaside组细胞中E2F5、c-Myc、CyclinD1和CyclinE2蛋白表达水平均明显降低(P＜0.05、0.01、0.001),cleaved PARP蛋白表达水平显著升高(P＜0.001).结论 21-hydroxy-neriaside具有抗胃癌活性,能够通过下调E2F5表达来影响细胞周期通路相关蛋白,抑制胃癌细胞生长,从而促使肿瘤细胞凋亡.

植韵诗、李晨阳、陈铁

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深圳大学医学部药学院,广东深圳 518055

深圳大学广东省天然小分子创新药物工程技术研究中心,广东深圳 518055

21-hydroxy-neriaside 强心昔类化合物 胃癌细胞 E2F转录因子5 细胞凋亡

B2020031

2022

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.18.014

中草药
天津药物研究院,中国药学会

中草药

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.632
ISSN：0253-2670
年,卷(期)：2022.53(18)
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