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侵染三七的三七Y病毒和中国番茄黄化曲叶病毒PCR同步检测技术

Simultaneous detection technology of PnVY and TYLCCNV in Panax notoginseng by PCR

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目的 建立一种高效、快速、准确地同步检测侵染三七Panax notoginseng的2种病毒——三七Y病毒(Paniax notoginiseng virus Y,PnVY)和中国番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leafcurl China virus,TYLCCNV)的双重PCR技术.方法 分别以单一感染PnVY或TYLCCNV及复合侵染了这2种病毒的染病三七植株为样品,CTAB法提取叶片总核酸作为模板,根据GenBank上已登录的PnVY和TYLCCNV这2种病毒核酸序列设计特异性检测引物.通过单一PCR技术明确染病三七样品PnVY和TYLCCNV的发生情况,筛选出可用于一步法双重PCR检测PnVY和TYLCCNV的引物组合及引物浓度,并对反应条件进行优化.对扩增产物进行克隆测序,验证一步法双重PCR检测的准确性和特异性.结果 建立的一步法双重PCR检测技术能同步有效地检测三七病样中的PnVY和TYLCCNV,检测灵敏度高,最低检测限点为核酸原液的0.01稀释倍数,特异性强.结论 所建立的一步法双重PCR检测技术可以高效、快速、准确、特异地同步检测三七样品中的PnVY、TYLCCNV2种病毒.

柳勤海、杨馨、李晓静、兰平秀、李凡、谭冠林

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云南农业大学植物保护学院,云南昆明 650201

云南农业大学现代教育技术中心,云南昆明 650201

三七 病毒检测 三七Y病毒 中国番茄黄化曲叶病毒 双重PCR技术

31660039202005AF150040

2022

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.24.023

中草药
天津药物研究院,中国药学会

中草药

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.632
ISSN：0253-2670
年,卷(期)：2022.53(24)
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